我们常用的细胞培养容器有T25培养瓶、10cm培养皿、多孔板等，尤其是是多孔板，需要加多少培养基，很多同学不太确定，下面小编为大家整理了常见的培养容器的加液体积和建议接种量：耗材名称规格培养面积(cm^2)加液体积（ml）建议接种量(×10^6）T25培养瓶底面积25cm^22551.25T75培养瓶底面积75cm^27515~303.75T175培养瓶底面积175cm^217535~408.756cm培养皿直径6cm21.251.0610cm培养皿直径10cm60.88~1...

一、贴壁细胞传代（以一个T25瓶为例）1、吸出原培养液；2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸出PBS丢弃；3、加入1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞，放入培养箱消化；4、消化时间跟据细胞特性有所不同，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显分离变圆，侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化，全程不要拍打培养瓶；5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱落并在液体里反复吹打使细胞，使之尽量呈单颗细胞的悬浮液，这时可以在显微镜看下；6、收集细胞悬液离心，1...

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下（适宜的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针（probe）,待测核酸序列可以是克隆的基因征段，也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的，能与特定...

上海科博瑞生物冻存的原代细胞应该如何培养，我司以客户为核心，以产品质量求生存，以售后服务求信誉，原代细胞通过不断改进来提高效率，绝不以牺牲品质作为代价。原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等。一、冻存原代细胞的培养1.将一管细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。2.将冻存管快速的放入37...

1、引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。2、引物长度一般在15-30碱基之间。引物长度（primerlength）常用的是18-27bp，但不应大于38bp，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于TaqDNA聚合酶进行反应。3、引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。G...

在人细胞ELISA试剂盒实验中，我们或多或少会遇到样本浓度接近试剂盒灵敏度，样本OD450值低于空白值的现象，尤其是血清和血浆样本，这可能是基质效应的结果。那么什么是基质效应呢？基质是指除目标分析物之外的样品部分。因为基质成分会显著干扰分析过程，影响分析结果的准确性。这些效应在业内统称为矩阵效应。这是人细胞ELISA试剂盒研发和使用中需要避免的雷。当单个样品或少量样品的数值低于空白值时，可能是实验操作中出现了问题。这时候就要增加重复，提高操作技术。当许多样品低于空白值时，应考...

氨基酸，是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物。羧酸碳原子上的氢原子被氨基取代后形成的化合物。氨基酸分子中含有氨基和羧基两种官能团。作用氨基酸在人体内通过代谢可以发挥下列一些作用：①合成组织蛋白质；②变成酸、激素、抗体、肌酸等含氨物质；③转变为碳水化合物和脂肪；④氧化成二氧化碳和水及尿素，产生能量。生理调节蛋白质在食物营养中的作用是显而易见的，但它在人体内并不能直接被利用，而是通过变成氨基酸小分子后被利用的。即它在人体的胃肠道内并不直接被人体所吸收，而是在胃肠道中经过多种消化酶...

细胞凋亡（apoptosis）指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。细胞凋亡与坏死的区别：虽然凋亡与坏死的最终结果极为相似，但它们的过程与表现却有很大差别。坏死（necrosis）：坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程。表现为细胞胀大，...