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技术文章/ Technical Articles

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  • DTT(二硫苏糖醇)的作用

    DTT(二硫苏糖醇)的作用DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,。常用还原剂,有抗氧化作用。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近。DTT的特性:DTT是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。由于容易被空气氧化,因此D...

    2023-01-31查看详情
  • 大鼠Bcl-2试剂盒选型和使用时要注意些什么?

    大鼠Bcl-2试剂盒的产品选型要注意这几点:1、是检测抗体还是抗原。(1)检测抗原常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法,但竞争法在具体实验中有些困难;特别是检测微生物的抗原,因为其需标记抗原,对于某些抗原很难做到甚至是不可能的。在竞争法中,没标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶抑制剂或蛋白A样物质(例如粪便),可影响elisa结果。(2)检测抗体检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法用于检测特异性IgG,IgA盒IgM。这个方...

    2023-01-09查看详情
  • 冻存过的全血为什么不建议再拿来做ELISA实验

    很多ELISA实验新手客户都会咨询我司技术能否把全血提取出来放-70℃条件保存,等实验开展了(比如一个月左右的时间)再离心全血取血清或者血浆做ELISA实验?这种做法我司技术都是持反对建议的。与此同时,也是明确要求我司销售人员在与客户售前沟通时建议老师全血样本提取好了应该及时离心出血清或者血浆。并要求-70℃条件下保存,如果一个月左右可以开展实验可以-20℃保存,期间不能反复冻融。至于冻存后的全血不可以再提取血清、血浆样本来做elisa的具体原因如下:1.全血冻存后解冻,用常...

    2023-01-09查看详情
  • 酶联免疫吸附实验(ELISA)基本原理

    一、基本原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和...

    2023-01-03查看详情
  • 常用中性红染色液的浓度及作用

    不同浓度中性红染色液的区别中性红(Neutralred),学名“3-氨基-7-甲氨基-2-甲基吩嗪盐酸盐”,深绿色、棕色或浅黑色粉末。溶解度为水4.0%,无水乙醇1.8%,乙二醇yi醚3.75%,乙二醇3.0%;几乎不溶于二甲苯,其水溶液或乙醇溶液呈红色是细胞活体染色和酸碱性指示剂的一种碱性吩嗪染料。细胞染色原理:中性红是一种弱碱性pH指示剂,变色范围pH6.4~8.0之间(由红变黄)。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌,由于液泡在一般情况下呈酸...

    2022-12-27查看详情
  • 科博瑞浅谈PCR试剂盒的使用

    PCR检测步骤1.将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;2.待测样本与步骤1所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。其中步骤1为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克...

    2022-12-20查看详情
  • 科博瑞平板计数简便方法

    细菌计数细菌细胞计数是建立或监测细菌生长速度、确定种群倍增时间所必需的。细菌培养物可以通过测定活细胞数来确定,活细胞数是每mL的菌落形成单位数(CFU/mL),或者通过使用分光光度计测量600nm处的光密度(OD600)来间接分析细胞总数。必须指出的是,细菌的生长速度和培养要求在不同菌种之间可能有很大的差异,因此很难用同一种方式量化所有的细菌。下面,科博瑞提供了一个关于如何确定细菌细胞计数的一般程序。活体计数:为了计数细菌悬浮液中的CFU,从活跃的细菌液体培养物中吸取一定的体...

    2022-12-14查看详情
  • 大鼠(Rat)苏氨酸(Threonine)ELISA检测试剂盒简介

    检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被苏氨酸(Threonine)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的苏氨酸(Threonine)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞...

    2022-12-09查看详情
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